冬虫夏草是一种极其珍贵的药食两用真菌，在真菌学上分类为子囊菌纲、肉座菌目、麦角菌科、草虫属。野生冬虫夏草均寄生在鳞翅目昆虫体内，且对生长环境要求较高，所以其产量受到极大限制。随着社会的发展和人们生活水平的提高，特别是对冬虫夏草医药作用的进一步挖掘，它的需求量越来越大，仅靠采集野生冬虫夏草远不能满足社会的需要。目前，人工培育的报道很少，仅是在实验室试管条件下，或是采用发酵方法生产冬虫夏草菌丝的方法。如CN1197843A公开的“中国冬虫夏草真菌的发酵生产方法”，就是采用液体培养基进行发酵生产，其产品无子实体。
本发明的目的是用人工模拟其生长条件的方法，来培育冬虫夏草子实体，以提高产量，满足人们的需要。
本发明采用的培养基原料为大米、玉米、谷糠、蚕蛹粉及由水、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、柠檬酸三铵、维生素B1配制而成的营养液。营养液的配方是每1000毫升水中加葡萄糖10克、蛋白胨5克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克、柠檬酸三铵1克、维生素B110毫克。培养基原料组分重量配比为大米20-25％、玉米10-15％、谷糠4-8％、蚕蛹粉1-2％、营养液50-55％。
本发明的培育方法(步骤)1、培养基的制作。在容器中按上述比例加入大米、玉米、谷糠、蚕蛹粉及营养液，容器封口，用常规方法灭菌后冷却备用。
3、养菌。将接入菌的容器置于12-17摄氏度的避光环境下培养20-25天，直至白色菌丝长满培养基2/3以上。
4、转色。在200勒克斯以上的光照条件下继续培养10天左右，菌丝由白色转为黄色。
5、刺激子实体原基的产生。转色后在昼夜温差10摄氏度以上的条件下予以刺激10天，培养基表面产生大量子实体原基。昼夜温差范围5-25摄氏度，同时在封口处穿孔，使培养空间适度通风，以供给充足的氧气。
6、子实体生长。在18-25摄氏度、相对湿度85-90％的条件下，稳定培养20-25天，子实体长满容器，长度达6-7cm。
7、摘收。打开封口，用带弯头的小铁铲将子实体从根部轻轻铲下，置于阴凉处凉干或烘干。
本发明的显著优点及积极效果1、人工培育的冬虫夏草经中国绿色食品学会检验，与天然冬虫夏草的化学成分基本相同；氨基酸种类完全相同，其含量大部分比天然冬虫草高出一倍。具体成分见附表1。
无机元素 在测定的26种无机元素中有15种元素与天然冬虫草相同，含量甚微；其余11种元素的含量较高，具体含量列入附表2。其中Ca、Al、Si、Zn、CrPG电子中奖秘籍略高于天然冬虫夏草，Ti、Cu略低于天然冬虫夏草，Fe比天然冬虫夏虫低270ppm，Mn低45ppm，重金属含量不超过15ppm。
核苷 人工与天然冬虫夏草的核苷类化合物含量比较接近，但人工虫草多含腺苷。具体含量列入附表3。
麦角甾醇和D-甘露醇。送检样品的麦角甾醇含量比天然虫草高出一倍，分别为0.15％和0.069％；D-甘露醇含量则比天然虫草低30％，分别为5.5％和8.1％。
维生素核黄素含量基本相同，为1.25mg/100g；硫胺素含量比天然虫草高得多，分别为0.34mg/100g和0.018mg/100g；β-类葫萝卜素含量为0.76mg/100g，而天然虫草中未检出；维生素C含量大大低于天然虫草，分别为4mg/100g和23.1mg/100g。
选用美国小白鼠进行动物试验，分为三组I空白、II人工虫草、III天然虫草。以一定剂量连续分别喂养45天，对其12项生理指标测试，结果表明II、III组明显优于I组，II、III组之间无明显差异。证明人工冬虫夏草在药理药效上与天然冬虫夏草基本一样，属药食两用高级滋补品。
3、人工培育冬虫夏草的方法具有较高的产量，采用室内立体培育，单位平方米每周可采150-200g，具有较好的经济效益。
4、本发明可极大地满足人们日益增大的对冬虫夏草的需求，保护野生冬虫夏草资源，具有较大的社会效益。
实施例1培养基为大米20％、玉米10％、谷糠4％、蚕蛹粉1％、营养液50％。其中营养液的配方为1000毫升水中加葡萄糖10克、蛋白胨5克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克、柠檬酸三胺1克、维生素B110毫克。培育步骤1、将上述培养基装入容器中，用聚丙烯塑料膜封口，置于0.1Mpa、120摄氏度下灭菌1.5小时后冷却备用；2、将冬虫夏草菌接入培养基中(在无菌条件下操作)；3、将接入菌种的容器置于12摄氏度的避光环境下培养20天，生长菌丝；4、在200勒克斯以上的光照条件下培养10天转色；5、将转色后的菌丝体在昼夜温差10摄氏度以上(白天5摄氏度，夜晚15摄氏度)的条件下刺激10天，并用牙签在封口处穿孔通风，产生大量的子实体原基；6、在18摄氏度、85％的相对湿度良好通风条件下，稳定培养20天，子实体长满容器(达6-7cm长)；7、打开封口，摘收子实体。
实施例2培养基为大米25％、玉米15％、谷糠8％、蚕蛹粉2％、营养液55％。其中营养液的配方同例1。培育步骤1、制备培养基(同例1)，2、接种(同例1)，3、养菌环境温度17摄氏度，避光培养25天，4、转色(同例1)，5、刺激子实体原基产生。昼夜温差10摄氏度(白天15摄氏度，夜晚25摄氏度)刺激10天，其余同例1，6、子实体生长在温度25摄氏度，相对湿度90％通风条件下培养25天，7、摘收子实体。
1.一种人工培育冬虫夏草的方法，其特征在于首先将菌种接入以大米、玉米、谷糠、蚕蛹粉及由水、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、柠檬酸三胺、维生素B1配成的营养液的培养基中，然后将接入冬虫夏草菌的容器置于12-17摄氏度的避光环境下，培养20-25天，生出白色菌丝，再在光照条件下继续培养10天，菌丝体由白色转为黄色，转色后在昼夜温差10摄氏度的条件下刺激10天，产生子实体原基，在温度18-25摄氏度，相对湿度85-90％的条件下，稳定培养20-25天，子实体长大、摘收；培养基的组分重量配比为大米20-25％、玉米10-15％、谷糠4-8％、蚕蛹粉1-2％、营养液50-55％，其中营养液的配方为每1000毫升水中加葡萄糖10克、蛋白胨5克、磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克、柠檬酸三胺1克、维生素B110毫克。
2.按照权利要求1所述的人工培育冬虫夏草的方法，其特征在于所述的光照条件大于200勒克斯。
3.按照权利要求1所述的人工培育冬虫夏草的方法，其特征在于所述的刺激子实体原基产生的条件，昼夜温差应在5-25摄氏度范围内，并在容器封口处穿孔通风。
4.按照权利要求1所述的人工培育冬虫夏草的方法，其特征在于所述的培养基的最佳组分重量配比为大米25％、玉米13％、谷糠6％、蚕蛹粉1％、营养液55％。
本发明涉及一种人工培育冬虫夏草的方法,首先将菌种接入以大米、玉米、谷糠、蚕蛹粉及由水、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、柠檬酸三胺、维生素B
发明者高平, 刘宝琦, 于艳琴, 冉翠香, 王莉, 李红卫 申请人:车振明
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